小鼠elisa試劑盒操作基本步驟

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小鼠elisa試劑盒操作的基本步驟：

1、 試(shi)劑準備：所(suo)有試(shi)劑在(zai)使(shi)用前應平衡至(zhi)室溫，使(shi)用后請(qing)立即按照說明(ming)書(shu)要(yao)求保存(cun)試(shi)劑。實驗操作中請(qing)使(shi)用一次(ci)性的吸(xi)頭，避(bi)免交叉污染。

2、 加樣：加樣或(huo)加試劑時，*個孔與zui后一個孔加樣之(zhi)間的(de)時間間隔如果太(tai)大，將會導致不同(tong)的(de) “預溫(wen)育"時間(jian)，從而明顯(xian)地影響到測(ce)量值的準確(que)性及重復(fu)性。一次加樣時間(jian)（包括標準品及所有(you)樣品）控制在(zai)10分鐘內。推薦設置復孔(kong)進行(xing)實驗。

3、 溫(wen)育(yu)：為防止樣品蒸發，實驗(yan)時(shi)將(jiang)加上蓋(gai)或覆膜的(de)酶標板(ban)置于濕盒內，以避(bi)免液體(ti)蒸發；洗板(ban)后應盡快進(jin)行下步操作(zuo)，任何時(shi)侯(hou)都應避(bi)免酶標板(ban)處(chu)于干燥狀態；同時(shi)應嚴格(ge)遵守給(gei)定(ding)的(de)溫(wen)育(yu)時(shi)間和溫(wen)度(du)。

4、 洗(xi)滌(di)：洗(xi)滌(di)過(guo)程中(zhong)(zhong)反(fan)應(ying)孔中(zhong)(zhong)殘留(liu)(liu)的(de)洗(xi)滌(di)液(ye)應(ying)在濾(lv)紙上(shang)拍干，勿(wu)將濾(lv)紙直接(jie)放入反(fan)應(ying)孔中(zhong)(zhong)吸水，同時要消(xiao)除板(ban)底殘留(liu)(liu)的(de)液(ye)體(ti)和手指印，避免影(ying)響zui后(hou)的(de)酶標儀讀數。

5、 試(shi)劑配制：Detection A及Detection B在(zai)使用前請手甩(shuai)幾下或(huo)少時離心處(chu)理(li)，以使管壁或(huo)瓶蓋的液(ye)體沉積到管底。標準(zhun)品(pin)、檢測溶液(ye)A工作液、檢測溶液B工作液請依據所需(xu)的量配(pei)制使用，并(bing)使用相應的稀釋液配(pei)制，不能(neng)混淆。請 配制(zhi)標準品及工(gong)作液，盡量(liang)不要微量(liang)配制(zhi)（如(ru)吸(xi)取檢測溶液A時，一次不(bu)要小于(yu)10 ），以避(bi)免由于不準確(que)稀釋而造成濃(nong)度誤(wu)差(cha)；請勿重(zhong)復使用已稀釋過的標準品、檢測溶液A工作液、檢測溶液B工作液。

6、 反應(ying)時間的(de)控制(zhi)：加入底(di)物后(hou)請定(ding)時觀察反應(ying)孔的(de)顏色變化（比如(ru)，每隔10分鐘），如顏色(se)較深，請提(ti)前加入終(zhong)(zhong)止(zhi)液終(zhong)(zhong)止(zhi)反應，避免反應過(guo)強(qiang)從而(er)影響酶標儀(yi)光密度(du)讀數。

7、 底物(wu)：底物(wu)請(qing)避光保(bao)存(cun)，在儲(chu)存(cun)和(he)溫育(yu)時避免(mian)強(qiang)光直(zhi)接照射。

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