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比普(pu)通(tong)DIG隨機(ji)引物法標記(ji)(ji)效(xiao)率高, 操(cao)作簡單, 可用于Southern、Northern和(he)斑點雜交以(yi)及菌落和(he)噬菌體篩選。一(yi)個Kit可用于12次(ci)標記(ji)(ji)反應和(he)24次(ci)檢測反應。組(zu)成: 5×DIG-高效(xiao)標記(ji)(ji)試(shi)劑; 未標記(ji)(ji)對照(zhao)DNA, PBR328; DNA稀(xi)釋液; 抗(kang)-DIG-堿性(xing)磷酸酶復合物; NBT/BCIP儲存液; 10×封閉液; DIG定量(liang)復試(shi)紙條(tiao); DIG對照(zhao)試(shi)紙條(tiao), -20℃保存。
Roche地高辛標記試劑盒選擇指南
地高辛標記常用的方法如下：
DNA – PCR labeling，random primed labeling，Nick Translation
RNA- in vitro transcription
寡核苷酸- 3 End Labeling，3 Tailing
不(bu)同的標(biao)記方法各(ge)有(you)差異，客戶可(ke)根(gen)據起(qi)始模板濃(nong)度、模板是否需(xu)要純化、探(tan)針檢測濃(nong)度、探(tan)針應用等幾個因(yin)素綜(zong)合考慮，選擇*的標(biao)記試劑盒，詳見表1。
表1 Roche地高辛標記試劑盒選擇指南
標記方法（試劑盒名稱） | 方法優點 | 起始模板量 | 可檢測的標記探針 | 探針應用 | 方法評論 |
PCR labeling PCR DIG探針合(he)成試劑(ji)盒 Cat#：11636090910 | ☆僅需少量(liang)的模(mo)板 ☆甚至可用不(bu)純(chun)的模板 ☆相比(bi)于其(qi)他(ta)方(fang)法，需更少的優(you)化步驟； ☆標記(ji)探針具高產(chan)量 ☆推薦用于非(fei)常短的(de)探針（＜100 bp） ☆產生(sheng)高靈敏度(du)探(tan)針 | ☆質(zhi)粒DNA，10- 100 pg（理想下用10 pg） ☆基因組DNA，1- 50 ng（理想(xiang)狀況(kuang)下用10 ng） | 0.10-0.03 pg DNA | ☆基因組(zu)southern ☆northern ☆也(ye)可(ke)用(yong)于dot/slot、文庫篩(shai)選和(he)原位雜交(jiao) | ☆開始(shi)標(biao)記反應前在無 DIG-dUTP的情況下(xia)，優(you)化PCR ☆模板濃(nong)度(du)對(dui)產生(sheng)靈敏度(du)探針 非常 重要 ☆使用更(geng)少的(de)DIG標記長(chang)探(tan)針(zhen) （＞1 kb） ☆勿用PCR DIG標記混合(he)物(wu) （DIG-dUTP:dTTP=1:20）替換試劑盒(he) 內的(de)標記混合（DIG-dUTP:dTTP=1:3） |
Random primed labeling，high efficiency DIG-high prime DNA標記與(yu)檢測起始試(shi)劑盒(he)I Cat#: 11745832910 DIG-high prime DNA標記與檢測起始試(shi)劑盒II Cat#: 11585614910 | ☆產生非常敏感的探針(zhen) ☆反應(ying)可(ke)擴大十倍 | ☆ 300ng DNA（針對可檢測單(dan)拷貝基因(yin)的(de)探針） ☆若標記(ji)反應(ying)(ying)反應(ying)(ying)guoye，模板量可(ke)更低(di) | 0.10-0.03 pg DNA | ☆基因組southern blots ☆文庫篩選 ☆也可用于dot/slot blots、northern blots | ☆需要高純度(du)的模(mo)板 ☆非常敏感于不純的模板 ☆用水或Tris buffer重懸模板(ban)。 勿用(yong)TE，因(yin)EDTA會一(yi)直標記反應 |
Nick Translation | ☆允(yun)許控制探針長度（原位(wei)雜(za)交(jiao)實驗非常重要） | ☆ 1 μg DNA | 主要用于原(yuan)位雜(za)交；靈敏(min)度因檢測方法(fa)而異； | ☆原(yuan)位雜交 | ☆需要(yao)高純(chun)度的模板 ☆標記前模(mo)板不要變性 |
RNA labeling DIG Northern 起始(shi)試劑盒Cat#：12039672910 | ☆產生(sheng)大(da)量標(biao)記(ji) ☆標記探針*不含載體序列 ☆RNA探針是單鏈 ☆RNA探(tan)(tan)針用于northen印(yin)跡(ji)靈敏度比(bi)DNA探(tan)(tan)針高 ☆原(yuan)位雜交實驗中DIG-標(biao)記的RNA探(tan)針(zhen)可輕(qing)易(yi)片段化 | ☆質(zhi)粒(li)DNA，線性化(hua)：1 μg ☆帶啟動(dong)子PCR 產物：100-200 ng | 0.10–0.03 pg DNA 0.10–0.03 pg RNA | ☆Northern ☆原位(wei)雜交 ☆文庫篩選(xuan) ☆Dot/slot | ☆需要高純度模板 |
3 End Labeling DIG 寡核苷酸(suan)3末端標記試劑盒，第(di)二代 Cat#： | ☆僅需(xu)要少量的模(mo)板 ☆反應可無限擴大 | ☆100 pmol寡核苷酸 | 10 pg DNA | ☆文(wen)庫篩選 ☆Dot/slot bl ☆原位雜交 | ☆寡(gua)核苷酸應用(yong)HPLC或Elutips（Schleicherand Schuell）純化 ☆探(tan)針不用(yong)純化即可用(yong)于下游實驗 |
3 Tailing DIG管核苷酸尾標記試劑盒，第二代 Cat#： | ☆僅需少量模板 ☆相比于末端標記法產生更靈(ling)敏的探針 ☆反應可無(wu)限擴(kuo)大 | ☆100 pmol寡核苷酸 | 1 pg DNA | ☆文庫(ku)篩選(xuan) ☆Dot/slot ☆原位雜交 | ☆寡(gua)核苷酸應用HPLC或Elutips（Schleicherand Schuell）純化 ☆探針不用(yong)純化即可用(yong)于(yu)下游實(shi)驗 |
| 羅氏地高辛(Roche)試劑 | |||
| 產品(pin)編號 | 產品(pin)名稱 | 產品包裝 | 產品價格 |
| 11745832910 | DIG高效DNA標記(ji)及檢測Starter Kit 1 | Kit：1 kit | ￥4,719 |
| 11585614910 | DIG高(gao)效DNA標記及檢測Starter Kit II | Kit：1 kit | ￥4,719 |
| 11093657910 | DIG(地(di)高辛)DNA標記及檢測試(shi)劑(ji)盒 | Kit：1 kit | ￥7,447 |
| 11175033910 | DIG DNA 標記試劑盒(he) | Kit(40個標(biao)記(ji)反應)：( | ￥6,545 |
| 11363514910 | DIG發(fa)光(guang)檢(jian)測試劑盒(可做50張10×10cm膜檢(jian)測反應) | Kit：(50 blots) | ￥4,796 |
| 11175041910 | DIG核酸檢(jian)測(ce)試劑盒 | 1 kit (40 blots) | ￥4,312 |
| 11480863001 | DIG寡核(he)苷酸5′末端(duan)標記試劑盒 | Set (10個標記反(fan)應) | ￥5,841 |
| 11636090910 | PCR DIG 探(tan)針合(he)成(cheng)試劑盒 | Kit(25個標記反應) | ￥4,884 |
| 11175025910 | DIG RNA標(biao)記試劑(ji)盒 | Kit：(2 x 10 labeling reactions) | ￥6,468 |
| 11585606910 | DIG 高效標記試劑 | 160μ1(40個(ge)標記(ji)反應) | ￥6,743 |
| 11093274910 | 抗地(di)高辛(DIG)堿(jian)性磷酸酶(mei)復合物 | 150u(200ul) | ￥2,156 |
| 11655884001 | CSPD化學發光底物 | 1ml | ￥2,695 |
| 11685627001 | CDP-Star化學發光底物(wu)CDP-Star | 1ml | ￥2,398 |
| 11277065910 | DIG DNA標記(ji)混合(he)物 | 50ul(25個反應) | ￥1,749 |
| 11603558001 | DIG 簡便雜交液 | 500ml | ￥1,771 |
| 11585762001 | DIG 清(qing)洗(xi)及阻斷緩沖液組合 | 1set(30 blots) | ￥2,299 |
| 11096176001 | 阻斷試劑 | 50g | ￥1,089 |
| 11209256910 | DIG標記的UTP | 250nmol(25μl) | ￥2,453 |
| 11093088910 | DIG標記的dUTP | 25nmol(25μl) | ￥2,827 |
| 11363905910 | DIG標記的ddUTP | 25nmol(25μl) | ￥1,925 |
| 11209272001 | 尼龍雜交轉印膜，帶(dai)正電荷 | 10 sheets | ￥Roche |
| 12039672910 | DIG高效RNA標記及檢測試劑盒 | 1 kit | ￥4,301 |
| 11277073910 | DIG高效標記RNA混合物 | 40 μl (20 reactions) | ￥1,551 |
| 3353575910 | DIG 3*末端寡核苷酸標記(ji)試劑盒 | 1 kit | ￥6,325 |
| 3353583910 | DIG Oligonucleotide Tailing Kit, 2nd generation | 1 kit (25 tailing reactions) | ￥5,335 |