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豬ELISA試劑盒操作注意事項

更新時間:2021-07-27 點擊次數:1117
  豬ELISA試劑盒具有敏感性高,特異性強,快速等特點,目前廣泛應用于農獸藥、真菌殘留檢測,該方法從加樣、洗板、顯色到讀數步驟繁多,其中任何一步控制不好都可能影響檢測結果的準確性。因此,在實際測定操作中要注意以下幾點。
  1.試劑(ji)盒回溫
  ELISA檢測試(shi)劑(ji)盒為(wei)冷藏(zang)(2℃-8℃)保(bao)存。從冰箱拿出來后(hou),先不要急于打(da)開(kai)試(shi)劑(ji)盒,要等試(shi)劑(ji)盒的溫度平衡至室(shi)溫且試(shi)劑(ji)盒盒表面無冷凝水,檢測所用(yong)的試(shi)劑(ji)需充分混勻且*溶解(jie)后(hou)再用(yong),提前(qian)1~2小時(shi)取出試(shi)劑(ji)盒,放在(zai)室(shi)溫中(zhong);或在(zai)預(yu)設(she)25℃恒溫培養箱中(zhong)平衡30分鐘~60分鐘。
  2.環境溫度的控制
  1)實(shi)驗室應配(pei)備溫濕度(du)表,且確(que)保定期(qi)計量(liang)。
  2)根據天氣(qi)情況設定實驗(yan)室空(kong)調制冷或加溫功能,待室溫穩定且無干擾的條件下再(zai)開始(shi)檢測流程。
  3)選用帶溫(wen)控裝置的孵育儀器(qi),如恒(heng)溫(wen)孵育器(qi)、恒(heng)溫(wen)培養(yang)箱、多功(gong)能酶標儀等。注(zhu)意(yi)要提(ti)前開啟預熱(re)。
  豬ELISA試劑盒的操(cao)作方法:
  1.包(bao)被:在每個聚苯(ben)乙烯板的反應孔(kong)(kong)中(zhong)加0.1ml,4℃過夜。次(ci)(ci)(ci)日,棄去(qu)孔(kong)(kong)內溶液(ye),用(yong)洗(xi)(xi)滌(di)緩沖液(ye)洗(xi)(xi)3次(ci)(ci)(ci),每次(ci)(ci)(ci)3分鐘。
  2.加樣:加一(yi)定稀釋(shi)的待(dai)檢樣品0.1ml于上述已包被之反(fan)應孔中(zhong),置(zhi)37℃孵(fu)育(yu)1小時,然(ran)后洗滌。
  3.加(jia)酶(mei)標抗(kang)體:于各反應孔中,加(jia)入新(xin)鮮稀釋(shi)的酶(mei)標抗(kang)體0.1ml。
  4.加(jia)底(di)物液顯色:于各反應孔中加(jia)入底(di)物溶液0.1ml,37℃10~30分鐘。
  5.終止反應:于(yu)各反應孔(kong)中加入酸0.05ml。
  6.結果判定:豬(zhu)ELISA試(shi)劑盒可(ke)于白色(se)背景上(shang),直接用肉眼觀察結果:反應孔(kong)內(nei)顏(yan)色(se)越(yue)深(shen),陽性程度越(yue)強,陰(yin)性反應為無色(se)或較淺(qian),依據所呈顏(yan)色(se)的(de)深(shen)淺(qian)。

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