ELISA（免疫酶聯吸附實驗）是免疫學基礎實驗之一，大部分生命科學領域的科研工作者對其都不陌生。因為其特異性強，靈敏度高，可精確定量的特性，在基礎科研和臨床診斷中，ELISA技術都應用廣泛，相信很多關注我們的小伙伴也都做過ELISA。 ELISA實驗步驟少，流程短(duan)，購買的(de)(de)即(ji)用型試劑盒也都有指導性(xing)很強的(de)(de)操作說明書，單次實驗3-6小(xiao)時即(ji)可得到結(jie)果，實驗小(xiao)白也可以(yi)很快(kuai)(kuai)的(de)(de)上手。但是，各(ge)位同學可不要輕(qing)視哦，ELISA和(he)WB、IHC等基礎免(mian)疫實驗一樣(yang)，都是易學難精，上手容易，但想要得到穩定的(de)(de)結(jie)果，還(huan)是要花(hua)一點心思的(de)(de)。這里匯總了(le)一些(xie)做(zuo)ELISA的(de)(de)客戶咨詢我們的(de)(de)問題，把其中有代表性(xing)的(de)(de)集中做(zuo)成(cheng)了(le)FAQ，大家快(kuai)(kuai)看(kan)看(kan)這其中有沒有困(kun)擾(rao)你ELISA實驗的(de)(de)問題吧(ba)！
1：ELISA可(ke)(ke)以(yi)檢(jian)測胞(bao)(bao)(bao)內蛋(dan)白(bai)么(me)？ 可(ke)(ke)以(yi)的，大(da)部(bu)分ELISA指標(biao)均(jun)為炎癥因子、趨(qu)化因子等(deng)分泌類型(xing)蛋(dan)白(bai)，支持(chi)的樣(yang)本類型(xing)也多為血(xue)清、血(xue)漿、細胞(bao)(bao)(bao)培養上清等(deng)液(ye)體樣(yang)本。如需檢(jian)測胞(bao)(bao)(bao)內蛋(dan)白(bai)，首先需要確認(ren)待(dai)測指標(biao)是否在胞(bao)(bao)(bao)內表達(da)，然后選用支持(chi)組織(zhi)勻漿樣(yang)本的ELISA試(shi)劑盒即可(ke)(ke)，將組織(zhi)樣(yang)品或(huo)細胞(bao)(bao)(bao)樣(yang)品進行裂解(jie)，提取胞(bao)(bao)(bao)內蛋(dan)白(bai)后進行蛋(dan)白(bai)定量，保證每孔上樣(yang)總蛋(dan)白(bai)量一致即可(ke)(ke)。
2：ELISA可以(yi)測DNA的表觀(guan)么？不可以(yi)，ELISA是利用(yong)免疫(yi)學原理，定量檢測蛋白質表達(da)的技術(shu)。測DNA表觀(guan)遺傳學，主要是檢測DNA甲基化，可以(yi)選用(yong)ChIP技術(shu)。
3：夾(jia)心法(fa)(fa)ELISA實驗中的捕獲(huo)抗(kang)(kang)(kang)體(ti)(ti)和檢測抗(kang)(kang)(kang)體(ti)(ti)是(shi)同(tong)一個抗(kang)(kang)(kang)體(ti)(ti)么(me)？不是(shi)的，在雙(shuang)抗(kang)(kang)(kang)夾(jia)心法(fa)(fa)ELISA實驗中，會同(tong)時用到捕獲(huo)抗(kang)(kang)(kang)體(ti)(ti)和檢測抗(kang)(kang)(kang)體(ti)(ti)，這兩個抗(kang)(kang)(kang)體(ti)(ti)是(shi)針對同(tong)一抗(kang)(kang)(kang)原(yuan)(yuan)蛋白的不同(tong)抗(kang)(kang)(kang)原(yuan)(yuan)位點(dian)的兩種抗(kang)(kang)(kang)體(ti)(ti)，這樣才可以同(tong)時結合(he)抗(kang)(kang)(kang)原(yuan)(yuan)分子(zi)。這也(ye)是(shi)雙(shuang)抗(kang)(kang)(kang)夾(jia)心法(fa)(fa)ELISA不適用與小分子(zi)抗(kang)(kang)(kang)原(yuan)(yuan)和半抗(kang)(kang)(kang)原(yuan)(yuan)等待測指標(biao)的原(yuan)(yuan)因。
4：試(shi)劑盒里面有捕(bu)(bu)獲(huo)抗體(ti)么？即用(yong)(yong)型ELISA試(shi)劑盒中，捕(bu)(bu)獲(huo)抗體(ti)已經預包被(bei)至試(shi)劑盒中的(de)ELISA板上，沒(mei)有單獨(du)的(de)捕(bu)(bu)獲(huo)抗體(ti)提供，直接(jie)使用(yong)(yong)ELISA板孵育(yu)稀(xi)(xi)釋(shi)(shi)后的(de)樣本及標準品即可。非(fei)即用(yong)(yong)型的(de)ELISA試(shi)劑盒會有捕(bu)(bu)獲(huo)抗體(ti)提供，需按(an)照(zhao)說明(ming)書推薦的(de)工作濃度，用(yong)(yong)稀(xi)(xi)釋(shi)(shi)液稀(xi)(xi)釋(shi)(shi)后自行(xing)包被(bei)。
5：捕獲(huo)(huo)(huo)抗體(ti)如(ru)何包被(bei)在(zai)96孔(kong)板(ban)(ban)(ban)(ban)上？如(ru)果(guo)選用的(de)是生物即(ji)(ji)用型(xing)ELISA試劑(ji)盒，無(wu)需(xu)(xu)進(jin)行抗體(ti)包被(bei)，因為試劑(ji)盒中的(de)檢測抗體(ti)已經事(shi)先(xian)(xian)包被(bei)在(zai)檢測板(ban)(ban)(ban)(ban)中；如(ru)果(guo)是非即(ji)(ji)用型(xing)的(de)ELISA試劑(ji)盒，需(xu)(xu)要(yao)自己在(zai)實驗(yan)前(qian)(qian)提(ti)前(qian)(qian)進(jin)行抗體(ti)包被(bei)，簡要(yao)步驟入下：首先(xian)(xian)，要(yao)選擇ELIS*別的(de)板(ban)(ban)(ban)(ban)子(zi)，材質應為聚苯(ben)乙烯；然后(hou)用抗體(ti)包被(bei)液將捕獲(huo)(huo)(huo)抗體(ti)稀釋(shi)（pH9.6的(de)碳酸(suan)鹽緩沖液或(huo)(huo)pH7.2的(de)PBS或(huo)(huo)pH7-8的(de)Tris-HCl）成工(gong)作濃度，再(zai)每孔(kong)加100 μl（96孔(kong)板(ban)(ban)(ban)(ban)加樣量）稀釋(shi)后(hou)的(de)捕獲(huo)(huo)(huo)抗體(ti)，室溫或(huo)(huo)4℃過夜包被(bei)，然后(hou)進(jin)行洗板(ban)(ban)(ban)(ban)和封閉(bi)之后(hou)再(zai)次洗板(ban)(ban)(ban)(ban)即(ji)(ji)可使(shi)用，如(ru)需(xu)(xu)長期(qi)保存，則需(xu)(xu)要(yao)真空凍干后(hou)保存。
6：ELISA實驗中(zhong)，酶標(biao)抗(kang)(kang)(kang)(kang)體(ti)是什么抗(kang)(kang)(kang)(kang)體(ti)？識別的(de)目標(biao)又(you)是什么？這(zhe)個問(wen)題需要具體(ti)分(fen)析，在直接(jie)法ELISA中(zhong)，酶標(biao)抗(kang)(kang)(kang)(kang)體(ti)直接(jie)識別抗(kang)(kang)(kang)(kang)原，即可檢(jian)測(ce)(ce)，但缺少二抗(kang)(kang)(kang)(kang)放(fang)大，且(qie)靈敏(min)性不高。在間接(jie)法ELISA中(zhong)，酶標(biao)抗(kang)(kang)(kang)(kang)體(ti)作為二抗(kang)(kang)(kang)(kang)，識別檢(jian)測(ce)(ce)抗(kang)(kang)(kang)(kang)體(ti)。而(er)在目前應用*的(de)雙抗(kang)(kang)(kang)(kang)夾心法ELISA中(zhong)，酶標(biao)抗(kang)(kang)(kang)(kang)體(ti)識別的(de)也是檢(jian)測(ce)(ce)抗(kang)(kang)(kang)(kang)體(ti)，對檢(jian)測(ce)(ce)抗(kang)(kang)(kang)(kang)體(ti)進(jin)行識別和酶標(biao)記(ji)。
7：試劑盒有推薦(jian)(jian)樣本(ben)稀釋濃度還需(xu)要自己測(ce)(ce)(ce)嗎？生物試劑盒一般會(hui)給出不同(tong)樣品類(lei)型的(de)的(de)推薦(jian)(jian)稀釋比例，但是為大(da)致范圍，最好還是根(gen)據自己的(de)樣本(ben)情況，設計(ji)預(yu)實(shi)驗測(ce)(ce)(ce)量(liang)計(ji)算。尤其是待測(ce)(ce)(ce)蛋白為炎癥(zheng)因(yin)子時，因(yin)為在不同(tong)組別樣本(ben)間差異巨大(da)，更是需(xu)要預(yu)實(shi)驗檢測(ce)(ce)(ce)后稀釋。
8：做實(shi)(shi)驗(yan)前怎么知(zhi)道(dao)待(dai)測血清中(zhong)炎癥(zheng)因(yin)子(zi)的(de)范(fan)圍呢？多大(da)是高多小(xiao)是低？需要根(gen)據文獻(xian)推測，一般在健(jian)康人(ren)樣本(ben)中(zhong)，炎癥(zheng)因(yin)子(zi)表(biao)達很低，接近ELISA檢測下限(xian)，樣品無需稀釋或(huo)1:1稀釋即可，如已知(zhi)為炎癥(zheng)疾病或(huo)造模樣本(ben)，可參考文獻(xian)，在預實(shi)(shi)驗(yan)中(zhong)設置1:10-100（或(huo)更高）的(de)稀釋比例，預實(shi)(shi)驗(yan)檢測后確(que)定最(zui)佳濃度進(jin)行正式實(shi)(shi)驗(yan)。
9：ELISA實驗(yan)中，檢(jian)測(ce)計算(suan)抗原(yuan)的(de)(de)濃(nong)度，臨界值怎么確定？根據(ju)曲(qu)線(xian)測(ce)定的(de)(de)濃(nong)度，建(jian)議(yi)落在標準(zhun)曲(qu)線(xian)的(de)(de)中間(jian)位置(zhi)較好，極限(xian)最好不要超(chao)過標準(zhun)曲(qu)線(xian)的(de)(de)上(shang)下限(xian)，如(ru)果超(chao)出較多，會影響計算(suan)結果準(zhun)確性(xing)，建(jian)議(yi)調(diao)整稀釋(shi)比例。
10：配好(hao)的(de)(de)(de)抗(kang)體沒(mei)用(yong)完(wan)如何保(bao)存(cun)，可(ke)保(bao)存(cun)多(duo)久？預實驗用(yong)了一(yi)個試(shi)(shi)劑(ji)盒里面的(de)(de)(de)部(bu)分板(ban)子和試(shi)(shi)劑(ji)，剩下的(de)(de)(de)板(ban)子和試(shi)(shi)劑(ji)還能繼續用(yong)于正(zheng)式實驗嗎？ 針對艾迪抗(kang)的(de)(de)(de)ELISA試(shi)(shi)劑(ji)盒來講，在(zai)(zai)(zai)說明書中有(you)各組分拆開后(hou)的(de)(de)(de)保(bao)質(zhi)期，配好(hao)的(de)(de)(de)母(mu)液和拆封的(de)(de)(de)板(ban)子，可(ke)以在(zai)(zai)(zai)四(si)度保(bao)存(cun)，保(bao)質(zhi)期為一(yi)個月(yue)左右。剩下的(de)(de)(de)板(ban)子和試(shi)(shi)劑(ji)在(zai)(zai)(zai)保(bao)質(zhi)期內是可(ke)以繼續用(yong)于正(zheng)式實驗的(de)(de)(de)，為保(bao)證實驗質(zhi)量，還是建議間(jian)隔時間(jian)不要太長，一(yi)周之(zhi)內更好(hao)，需注意試(shi)(shi)劑(ji)避免污染(ran)，板(ban)子保(bao)持干燥。
11：in vivo實(shi)(shi)驗周期長，不太(tai)好(hao)做(zuo)預實(shi)(shi)驗，對ELISA結果會有(you)影響么？怎么辦？如果您實(shi)(shi)驗室之前(qian)建(jian)立的(de)in vivo實(shi)(shi)驗protocol經過驗證，可(ke)以保證有(you)效性，那么，可(ke)以不用再進(jin)行相(xiang)關的(de)預實(shi)(shi)驗；并且，如果實(shi)(shi)驗周期較(jiao)長，樣(yang)(yang)本(ben)獲取不易，同時(shi)又(you)需要(yao)檢測較(jiao)多指標，建(jian)議將(jiang)樣(yang)(yang)品(pin)分裝凍存，避免反復凍融。ELISA實(shi)(shi)驗還是建(jian)議進(jin)行一下預實(shi)(shi)驗，摸清楚樣(yang)(yang)本(ben)的(de)最(zui)佳稀釋比(bi)例，取得更好(hao)的(de)實(shi)(shi)驗結果。
12：檢(jian)測樣本(ben)是細(xi)(xi)胞(bao)(bao)培養上清，那么細(xi)(xi)胞(bao)(bao)數(shu)目對炎(yan)癥因子的濃(nong)度有影響嗎？有影響，所(suo)以(yi)不(bu)同樣本(ben)可以(yi)比較(jiao)的前提條件是培養細(xi)(xi)胞(bao)(bao)數(shu)水(shui)平接(jie)(jie)近一致(zhi)。因不(bu)同處理，可能會導致(zhi)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)生產狀態不(bu)同，要保證(zheng)在(zai)鋪板時接(jie)(jie)種細(xi)(xi)胞(bao)(bao)數(shu)量(liang)水(shui)平一致(zhi)。
13：打開試劑盒，發現wash buffer析出(chu)(chu)結(jie)晶(jing)，對(dui)實驗(yan)結(jie)果有(you)影(ying)響么(me)？怎么(me)辦？ wash buffer為(wei)高濃度鹽溶(rong)液，在(zai)低溫(wen)保存條件下，有(you)可能出(chu)(chu)現結(jie)晶(jing)析出(chu)(chu)，為(wei)正常(chang)現象，可以放在(zai)37℃或55℃烘箱中，析出(chu)(chu)的結(jie)晶(jing)會溶(rong)解，溶(rong)解后可正常(chang)使(shi)用。不可以在(zai)結(jie)晶(jing)存在(zai)的情況下配置wash buffer。
14：一(yi)般(ban)(ban)ELISA試劑盒(he)顯色(se)液(ye)是(shi)雙(shuang)組(zu)份的(de)(de)，有(you)些(xie)其他品牌的(de)(de)是(shi)單(dan)組(zu)分(fen)(fen)的(de)(de)，使(shi)用(yong)單(dan)組(zu)分(fen)(fen)的(de)(de)有(you)影(ying)(ying)響(xiang)么？ HRP酶標二抗的(de)(de)ELISA試劑盒(he)，顯色(se)底物一(yi)般(ban)(ban)為(wei)(wei)TMB，TMB不(bu)穩(wen)定，曝光(guang)或(huo)污(wu)染(ran)氧化(hua)后會出現(xian)顯色(se)反應，導(dao)致實驗(yan)背景升高，或(huo)無(wu)(wu)法使(shi)用(yong)，一(yi)般(ban)(ban)試劑盒(he)將顯色(se)液(ye)調(diao)整為(wei)(wei)雙(shuang)組(zu)份，方便穩(wen)定保(bao)存，僅在(zai)使(shi)用(yong)前(qian)混合，避免了TMB的(de)(de)不(bu)穩(wen)定影(ying)(ying)響(xiang)實驗(yan)結(jie)果。如(ru)您選用(yong)的(de)(de)試劑盒(he)為(wei)(wei)單(dan)組(zu)分(fen)(fen)顯色(se)液(ye)，在(zai)使(shi)用(yong)前(qian)檢測是(shi)否為(wei)(wei)無(wu)(wu)色(se)透明，如(ru)果是(shi)正常的(de)(de)，對結(jie)果也沒有(you)影(ying)(ying)響(xiang)，可以(yi)放心使(shi)用(yong)。
15：同(tong)一樣(yang)品多(duo)次ELISA檢測，測試結果差異大怎(zen)么解決？應考慮的問題包括(kuo)：樣(yang)本(ben)保(bao)存(cun)不(bu)當，會(hui)導致多(duo)次實驗(yan)結果偏差較大，樣(yang)本(ben)應盡量減少反復凍融，如需多(duo)次檢測，需在取樣(yang)后(hou)分裝保(bao)存(cun)；樣(yang)品凍融之后(hou)未混(hun)勻，應混(hun)勻后(hou)再上(shang)樣(yang)；加(jia)樣(yang)不(bu)準確，微量樣(yang)品加(jia)樣(yang)時要注意移液器槍頭不(bu)要有殘留
16：副孔差別(bie)比(bi)較(jiao)(jiao)大，是(shi)沒洗(xi)干凈嗎？復孔值差異較(jiao)(jiao)大，主要原因應考慮加樣是(shi)否(fou)準確，洗(xi)板過(guo)程(cheng)(cheng)(cheng)中是(shi)否(fou)有殘留以及是(shi)否(fou)有交(jiao)叉污(wu)染(ran)。加樣應注意(yi)(yi)移液(ye)器量程(cheng)(cheng)(cheng)，以及槍頭殘留問(wen)題；洗(xi)板過(guo)程(cheng)(cheng)(cheng)應注意(yi)(yi)不(bu)要有殘留液(ye)體，需要進行拍干操作；孵育過(guo)程(cheng)(cheng)(cheng)要更(geng)換封板膜(mo)，拍干過(guo)程(cheng)(cheng)(cheng)要換吸水紙(zhi)，避免交(jiao)叉污(wu)染(ran)。
17：加(jia)(jia)完終(zhong)止(zhi)液之(zhi)后(hou)測的幾次(ci)數(shu)據差別也蠻(man)大，是什么原因？加(jia)(jia)完終(zhong)止(zhi)液后(hou)，顯(xian)色(se)反應也不是永遠停止(zhi)，形成的黃色(se)顏(yan)色(se)會隨著時間延長繼續加(jia)(jia)深(shen)，建議在15 min內讀數(shu)。
18：整個過程需(xu)(xu)要避(bi)(bi)光(guang)嗎？避(bi)(bi)光(guang)需(xu)(xu)要避(bi)(bi)到(dao)什么程度呢(ni)？ELISA實驗中，在(zai)酶標(biao)抗體孵(fu)育，以及(ji)顯色底物孵(fu)育這(zhe)兩步(bu)建議避(bi)(bi)光(guang)，其(qi)他步(bu)驟無(wu)需(xu)(xu)避(bi)(bi)光(guang)。避(bi)(bi)光(guang)可采用錫紙包裹，或將整個ELISA板子放入暗盒或抽屜等無(wu)光(guang)處(chu)即可。
19：封板(ban)(ban)膜什么時(shi)候用(yong)？每次加液后(hou)(hou)都要(yao)換嗎(ma)？封板(ban)(ban)膜在孵育(yu)樣(yang)品、檢測(ce)抗體(ti)以(yi)及(ji)HRP酶標抗體(ti)時(shi)，都要(yao)蓋(gai)好(hao)封板(ban)(ban)膜，減少揮發及(ji)污染幾率。每次使用(yong)后(hou)(hou)要(yao)更換新的(de)封板(ban)(ban)膜。
20：ELISA實驗中的洗(xi)板(ban)(ban)步驟如果沒有洗(xi)板(ban)(ban)機(ji)，需要(yao)如何操(cao)作？生(sheng)物(wu)實驗室ELISA實驗做的較多，還是建議使用(yong)洗(xi)板(ban)(ban)機(ji)洗(xi)板(ban)(ban)，效果更好(hao)，也(ye)更方便控制。如果沒有洗(xi)板(ban)(ban)機(ji)，在(zai)(zai)洗(xi)板(ban)(ban)過程(cheng)中，需要(yao)注(zhu)意(yi)洗(xi)板(ban)(ban)液(ye)添加(jia)(jia)后(hou)不要(yao)從(cong)孔中溢出，在(zai)(zai)加(jia)(jia)洗(xi)板(ban)(ban)液(ye)后(hou)，靜(jing)置1-2min，甩干(gan)(gan)液(ye)體后(hou)，在(zai)(zai)吸(xi)水紙上大力拍干(gan)(gan)；重復三次。
21：手動洗板過程中，拍過抗體或抗原的(de)(de)濾紙需(xu)要扔嗎？是需(xu)要更換(huan)的(de)(de)，防止造成交叉(cha)污染，影響(xiang)實驗結果的(de)(de)準(zhun)確(que)性。
22：ELISA實(shi)驗中，檢測計算(suan)抗原的(de)(de)濃度，臨界值怎么確定？根據曲(qu)線測定的(de)(de)濃度，建(jian)議(yi)落在標準(zhun)(zhun)曲(qu)線的(de)(de)中間(jian)位(wei)置(zhi)較好(hao)，極限(xian)最好(hao)不(bu)要超(chao)(chao)過標準(zhun)(zhun)曲(qu)線的(de)(de)上下限(xian)，如果超(chao)(chao)出(chu)較多，會(hui)影響計算(suan)結果準(zhun)(zhun)確性，建(jian)議(yi)調整稀釋比例。
23：ELISA實驗中(zhong)，檢測(ce)計(ji)算(suan)抗原的(de)濃(nong)度，臨界值怎么確(que)定？根據曲線(xian)(xian)測(ce)定的(de)濃(nong)度，建(jian)議落在標準(zhun)曲線(xian)(xian)的(de)中(zhong)間位(wei)置較好，極(ji)限最好不要(yao)超(chao)過標準(zhun)曲線(xian)(xian)的(de)上下限，如果(guo)超(chao)出較多，會(hui)影響計(ji)算(suan)結果(guo)準(zhun)確(que)性，建(jian)議調整稀釋(shi)比例(li)。
24：測得(de)的(de)值都低于標(biao)準(zhun)曲線的(de)低值，是什么(me)原因(yin)，應(ying)該(gai)怎么(me)解(jie)決？ 這種情況(kuang)需要(yao)設置實(shi)驗(yan)對(dui)(dui)照(zhao)組來(lai)排查(cha)，建議在實(shi)驗(yan)組別設置中(zhong)添加陽性(xing)(xing)對(dui)(dui)照(zhao)孔，用(yong)明(ming)確(que)表(biao)達的(de)樣品作為(wei)陽性(xing)(xing)對(dui)(dui)照(zhao)，如果(guo)標(biao)準(zhun)曲線及陽性(xing)(xing)樣品均可(ke)測得(de)正常的(de)表(biao)達濃(nong)度，則(ze)表(biao)明(ming)實(shi)驗(yan)成功，檢(jian)(jian)查(cha)其他待測樣品是否稀(xi)釋倍數過高，可(ke)以降(jiang)低稀(xi)釋比，直至直接加樣本(ben)原液，如還(huan)檢(jian)(jian)測不出，則(ze)表(biao)明(ming)該(gai)指標(biao)在其余待測樣品表(biao)達含量低于檢(jian)(jian)測下(xia)限，按照(zhao)0計(ji)算即可(ke)。這種情況(kuang)尤其對(dui)(dui)于炎癥因(yin)子較為(wei)常見，在健康樣本(ben)中(zhong)，表(biao)達含量極低。
25：標準曲線在(zai)推薦的(de)濃(nong)度下，r2值(zhi)為0.9，做了(le)(le)多次都是(shi)這樣，怎么辦？這種情況首先(xian)要仔細核對產品說明(ming)書，看是(shi)否(fou)用了(le)(le)推薦的(de)擬合(he)方(fang)(fang)法(fa)，一般的(de)ELISA試劑(ji)盒，需要使用四參(can)數擬合(he)方(fang)(fang)式(shi)進行(xing)擬合(he)，用錯擬合(he)方(fang)(fang)式(shi)，會導(dao)致r2值(zhi)較(jiao)低；如(ru)擬合(he)方(fang)(fang)式(shi)無誤，需檢查是(shi)否(fou)有(you)個別標曲孔數值(zhi)異常，排(pai)查實驗(yan)過(guo)程中是(shi)否(fou)出(chu)現(xian)污染或標準品倍比(bi)稀釋(shi)時(shi)出(chu)現(xian)失誤，導(dao)致加樣不(bu)準。
26：樣本總是(shi)在標準曲線之外(wai)，稀(xi)釋(shi)100倍(bei)也是(shi)，怎(zen)么辦？在設(she)置(zhi)稀(xi)釋(shi)倍(bei)數(shu)之前(qian)，需要參考相關文獻，對于一些表達*的(de)(de)蛋白，確(que)實會出(chu)現這種(zhong)情況(kuang)，之前(qian)接到過的(de)(de)案例(li)，樣品需要稀(xi)釋(shi)10000倍(bei)，目(mu)的(de)(de)蛋白才(cai)落在檢測區間內。建議繼(ji)續(xu)提高稀(xi)釋(shi)比例(li)。
27：最后顯示的(de)(de)OD值(zhi)在(zai)多少之間屬于可用(yong)值(zhi)，有要求(qiu)嗎？ 有的(de)(de)，建議標準曲(qu)線(xian)最高濃度點的(de)(de)OD值(zhi)在(zai)2.0左右較好，也(ye)可參考說明書(shu)標曲(qu)的(de)(de)數據(ju)。
